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RP-HPLC法同时鉴别含甘草和陈皮的中成药
整理时间:2006-10-20 16:44:56  资料来源:,  查看次数:2563
 
 
提要:用反相高效 液相色谱 法(RP-HPLC),在同一色谱条件下,同时对古甘草和陈皮的中成药进行定性鉴别。流动相为甲醇:水(63:37)含0.005 mol/L氢氧化四丁基铵,pH 6.50;254 nm波长处检测;柱温40℃;Shimpack CLC ODS(6.0mm×150mm)为分析柱。在该条件F可同时对甘草、陈皮定性鉴别。并测定了各中成药中甘草酸的含量。
关键词:反相高效 液相色谱 中成药 甘草 陈发 定性鉴别

    甘草为豆科植物乌拉尔甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch),胀果甘草(Glycyrrhlza inflata Bat.)或光果甘草(Glycyrrhiza glaba L )的干燥根及根茎;陈皮为芸香科植物橘(Citrus rellactata Blanco)及其栽培变种的干燥成熟果皮,两者均广泛应用于中成药。为了有效地控制中成药的质量.用RP—HPLC法在同一色谱条件下对含甘草和陈皮的中成药进行了定性鉴别.并对甘草中有效成分甘草酸进行了含量测定。方法简便、准确、灵敏、快速。

l 实验部分
1.1 仪器与试药:日本岛津LC一9A高效 液相色谱 仪;包括SPD一6AV 紫外可见检i91l器;C~R4A数据处理机;SCL 6B 自动进样品;CQ一250超声振荡器;纯水(西南技术物理所);10 氢氧化四丁基铵(TBAH,日本和光纯药株式会社);其它试剂均为分析纯。甘草、陈皮等中药均为市售品,并经鉴定。藿香正气散、苏子降气汤、香沙六君子汤、二陈汤、温胆汤等均为自制。
1.2 色谱条件
    分析柱为Shimpaek CLC ODS(6.0 mm×1 50 mm);流动相为甲酵:水(63:37)(含0.005 mol/L TBAH,pH 6.5),检测波长为254nm;柱温为4O℃;灵敏度为0.02AUFS。
1.3 供试品溶液的制备
    精密称取各成药粉末约0.5 g,加入稀乙醇35 mI,空气浴振荡器振荡l h,过滤,洗涤.定容成5O ml;精密称取甘草、陈皮单昧生药和按处方自制缺甘草、缺陈皮的模拟阴性对照浸膏一定量.以同样方法提取.制得供试品溶液。
1.4 实验结果
    取甘草、陈皮单昧药供试液、阴性对照液以及各成药供试品液各lOμ1.按上述色谱条件操作,分别绘制色谱图,经对照分析,各成药中甘草、陈皮均有特殊对应峰(图1~ 4),可予以确认。

2 讨论
2.1 虽然各国药典收载的天然药物及其制剂的定性鉴别多采用薄层色谱法(TLC),但影响因素较多,而且中成药成分极为复杂,样品的预处理过程比较烦琐,重现性差.灵敏度低。应用HPLC法分离并测定中成药中的有效成分,则可克服上述缺点,且简便、快速。用RP—HPLC法在同一色谱条件下同时对含甘草、陈皮的中成药进行定性鉴别,得到满意的结果。
2.2 甘草、陈皮中多为酸性成分,采用反相离子对 液相色谱 法可避免其它成分对测定的干扰,达到同时对二味中药的定性鉴别 陈皮中橙皮苷在该实验条件下不能出峰,若需进行橙皮苷的定量狈}定,进需选择其它的色谱条件。
2.3 甘草是日本国厚生省监修的“一般用汉方处方手册”中所收载的汉方处方210种中,与150种处方配伍的使用频率最高的生药(71.4%),甘草酸为甘草的有效成分,定量测定不仅对甘草重要,对汉方制剂也很重要,在该色谱条件下。作为甘草的确认峰,该峰尖锐,对称,可进行定量测定(表1)。
 
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