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| HPLC法测定樟脑苯酚溶液中樟脑和苯酚的含量 |
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| 整理时间：2006-10-14 10:19:29 资料来源：,, 查看次数：1143 |
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摘要： 建立高效  液相色谱 法同时测定樟脑苯酚溶液中樟脑和苯酚的含量。采用Spherisorb C18色谱柱，流动相为甲醇-水(60：40)，流速1.0ml/min，检测波长268nm。樟脑和苯酚的线性范围分别为O.6084～1.825mg/ml，O.3012～O.9036mg/ml；平均回收率分别为99.81％ (RSD=O.86％)，100.2％(RSD=1.4％)。本法操作简便，结果准确。
关键词： 高效 液相色谱 法；樟脑苯酚溶液；樟脑；苯酚
樟脑苯酚溶液是由樟脑、苯酚、乙醇组成的医院制剂。其主要成份樟脑在常温下易挥发，苯酚易氧化，因此为保证制剂的疗效，在生产和储存过程中控制其主成份的含量很有必要，但原质量标准中没有樟脑的含量测定方法，苯酚制剂的含量测定方法已有报导。本文建立了HPLC法同时测定樟脑苯酚溶液中樟脑和苯酚含量的方法，可用于樟脑苯酚溶液的质量控制。
1 仪器与试药
LC-10A高效 液相色谱 仪(日本岛津)；樟脑、苯酚对照品(中国药品生物制品检定所)；樟脑苯酚溶液(河南省濮阳市人民医院制剂中心)；乙醇为分析纯、甲醇为色谱纯、水为纯化水。
2 方法与结果
2．1 色谱条件和系统适用性试验
色谱柱： Spherisorb C18 (4.6mm X 250mm，5μm)。流动相：甲醇-水(60：40)，流速：1.0ml/min，检测波长：268nm，柱温：室温，进样量：20μl。在此色谱条件下，测得樟脑、苯酚的对照品混合液、阴性样品(不含樟脑、苯酚)和樟脑苯酚溶液样品色谱图。樟脑、苯酚的理论板数分别为5400、13000，分离度大于1.5。
2．2 线性关系考察
精密称取樟脑对照品101.4mg、苯酚对照品50.2mg，置50ml量瓶中加甲醇适量，振摇使溶解，并用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。精密量取对照品溶液1.5、2.O、2.5、3.O、3.5、4.0、4.5m1分别置5ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。分别取上述溶液20μl，注入 液相色谱 仪，记录色谱峰面积，以峰面积(Y)对进样量
(X)，线性回归。樟脑、苯酚的回归方程分别为：Y樟=-46.28+2.756×l00000X，r=0.9997；Y苯=-23.13+1.191×1000000X，r=0.9998。
线性范围分别为0.6084～1.825mg/ml，0.3012～0.9036mg/ml。
2．3 精密度及稳定性
取同一对照品溶液(每lml约含樟脑1.2mg、苯酚0.6mg)，每次进样20μl，连续进样5次，记录樟脑、苯酚色谱峰面积，计算RSD。将上述溶液室温保存，分别于日内和日间进行测定，记录樟脑、苯酚色谱峰面积，计算RSD。
2．4 重复性试验
取同一批样品，连续取样测定5次，樟脑、苯酚色谱峰的RSD分别为1.8％、1.7％。
2．5 回收率试验
按樟脑苯酚溶液处方比例及其制备方法，精密称取樟脑、苯酚对照品制成二主药浓度为标示浓度的80％、100％、120％各三份模拟样品溶液，按样品测定方法测定，计算回收率及RSD。
2．6 样品测定
对照品溶液的制备 分别取樟脑对照品约60mg、苯酚对照品约30mg，精密称定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。样品溶液的制备精密量取樟脑苯酚溶液5ml置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，再精密量取2ml置100ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
分别精密吸取上述两种溶液各20μl，注入 液相色谱 仪，记录樟脑、苯酚色谱峰面积，按外标法计算含量。
3 讨论
3．1 检测波长的选择
经过在190～400nm波长范围内，对樟脑、苯酚对照品溶液进行紫外光谱扫描，结果表明，樟脑在286nm波长处有最大吸收，苯酚在272nm波长处有最大吸收，由于苯酚的紫外吸收特别强，故选用286nm为检测波长，以增强樟脑的色谱信号响应，保证樟脑和苯酚都能准确测定。
3．2 溶剂的选择
由于樟脑在水中极微溶解，且樟脑在样品中含量较高，因此在制备样品溶液时，用甲醇作稀释溶剂，而不采用流动相，以增强其溶解性，避免有少量樟脑析出，影响测定结果。
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